АНАЛИЗ УГЛЕВОДОВ ДЛЯ ПРОТОКОЛОВ ДЕПОНИРОВАНИЯ СОРТОВ ВИНОГРАДА КАБЕРНЕ СОВИНЬОН, ФИОЛЕТОВЫЙ РАННИЙ, ПУХЛЯКОВСКИЙ
CARBOHYDRATE ANALYSIS FOR DEPOSITION PROTOCOLS FOR CABERNET SAUVIGNON, FIOLETOVIY RANNIY, PUHLYAKOVSKY GRAPEVINE VARIETIES
| В.Г. Пузырнова,1 Н.П. Дорошенко2
1. Новочеркасский инженерно-мелиоративный институт имени А.К. Кортунова ФГБОУ ВО Донской ГАУ, e-mail: valentina.puzirnova@yandex.ru 2. Всероссийский научно-исследовательский институт виноградарства и виноделия имени Я.И. Потапенко – филиал Федерального государственного бюджетного научного учреждения «Федеральный Ростовский аграрный научный центр», Новочеркасск, Россия |
V.G. Puzirnova1, N.P. Doroshenko2
1. Novocherkassk Reclamation Engineering Institute named after A.K. Kortunov FSBEI HE Donskoy SAU, Novocherkassk, Russia e-mail: valentina.puzirnova @yandex.ru 2. All-Russian Research Ya.I. Potapenko Institute for Viticulture and Winemaking – branch of Federal State Budget Scientific Institution «Federal Rostov Agricultural Research Center», Novocherkassk, Russia
|
| Аннотация. Традиционные полевые коллекции имеют ряд существенных недостатков: требуют трудоемкого ухода и затратны в содержании (полив, обрезка, фитопатологический и энтомологический надзор), уязвимы к климатическим изменениям и катаклизмам. Эти недостатки подчеркивают важность комплексного подхода к поддержанию биоразнообразия рода Vitis и необходимостью дополнения традиционных форм хранения растений микроклональными. Метод in vitro позволяет хранить растения в стерильных строго контролируемых условиях, что минимизирует риск инфекций и поражений, может обеспечить ускоренное размножение и селекцию. С целью повышения эффективности сортовых протоколов создания и содержания коллекций рода Vitis в культуре in vitro проведено исследование по подбору оптимальных углеводов в составе культуральных сред. Изучение реакции растений на различные углеводы велось на протяжении нескольких лет на микроклональной коллекции растений винограда в лаборатории биотехнологии винограда Всероссийского НИИ виноградарства и виноделия имени Я.И. Потапенко на сортах: Фиолетовый ранний, Каберне Совиньон, Пухляковский. Изучены особенности роста и развития растений винограда на культуральных средах с различными углеводами: сахароза, сорбит, маннит и без углевода. Проведенные исследования выявили оптимальные углеводы и их концентрации для трех сортов – Каберне Совиньон, Фиолетовый ранний, Пухляковский для максимальной сохранности и продолжительности культивирования при депонировании в условиях медленнорастущей коллекции винограда in vitro. Полученные результаты позволят усовершенствовать биотехнологию создания и содержания коллекций винограда in vitro. Область применения – биотехнология, коллекции растений in vitro, природные ресурсы. | Summary. Traditional field collections have a number of significant disadvantages: they require time-consuming maintenance and are expensive to maintain (watering, pruning, phytopathological and entomological monitoring), and are vulnerable to climatic changes and cataclysms. These disadvantages emphasize the importance of an integrated approach to maintaining the biodiversity of the genus Vitis and the need to supplement traditional forms of plant storage with microclonal ones. The in vitro method allows plants to be stored in sterile, strictly controlled conditions, which minimizes the risk of infections and lesions, and can ensure accelerated reproduction and breeding. In order to increase the effectiveness of varietal protocols for the creation and maintenance of collections of the genus Vitis in culture in vitro, a study was conducted on the selection of the optimal carbohydrate in the composition of culture media. The reaction of plants to various carbohydrates has been studied for several years on a microclonal collection of grapevine plants in the Laboratory of Grape Biotechnology of the All-Russian Research Institute of Viticulture and Winemaking named after Ya.I. Potapenko on the varieties Fioletoviy ranniy, Cabernet Sauvignon, Pukhlyakovsky. The peculiarities of the growth and development of vine plants on culture media with various carbohydrates: sucrose, sorbitol, mannitol and without carbohydrates have been studied. The conducted studies revealed the optimal carbohydrate and its concentration for three varieties – Cabernet Sauvignon, Fioletoviy ranniy, Pukhlyakovsky for maximum preservation and duration of cultivation during deposition in a slow-growing vine collection in vitro. The results obtained will make it possible to improve the biotechnology of creating and maintaining grapevine collections in vitro. The field of application is biotechnology, in vitro plant collections. |
| Ключевые слова: виноград, коллекция генофонда in vitro, клональное микроразмножение, сахароза, сорбит, маннит, депонирование | Keywords: grapevine, in vitro gene pool collection, clonal micropropagation, sucrose, sorbitol, mannitol, deposition |
| DOI: 10.32904/2712-8245-2025-33-16—24 |
Введение. Биотехнология сохранения растений играет ключевую роль в охране биологического разнообразия и устойчивом развитии сельского хозяйства. Она представляет инструменты и методы для эффективного сохранения и восстановления растительных ресурсов, что имеет важное значение для экосистем и человеческого общества в целом [1–3]. Создание и поддержание коллекций представителей ценного генофонда относится к приоритетным направлениям в нашей стране, что отражено в ряде стратегических документов Российской Федерации, последним из которых является Федеральная научно-техническая программа развития генетических технологий на 2019–2027 гг.
В сфере нашего научного интереса – сохранение генетического разнообразия рода Vitis. Коллекции растений винограда являются важным инструментом для сохранения и изучения сортов, селекции и обеспечения продовольственной безопасности.
Микроклональные коллекции винограда являются важным инструментом в ботанике, агрономии, селекции растений, а также позволяют не просто собирать и хранить генетически ценный материал, но и производить обмен генетическими ресурсами между научными учреждениями [4].
Сортоспецифичный ответ растений на методы клонального микроразмножения определяет необходимость сортоориентированного подхода [5–7].
Наиболее экономически эффективного и безопасного для растений хранения в коллекциях in vitro можно добиться в условиях замедленного роста. Для увеличения интервала между пассажами используют различные методы и приемы, основанные на замедлении роста пробирочных растений.
Один из способов торможения роста растений – увеличенные или пониженные концентрации разных углеводов.
Осмотики – вещества, имитирующие для растения недостаток влаги. Действие водного стресса на растение выражается в изменении физиолого-биохимических и анато-морфологических процессов, в том числе снижении скорости ростовых процессов [8].
Сахароза – лучший субстрат для роста изолированных культур, в частности для культуры винограда in vitro. Это определяется рядом структурных особенностей сахарозы, обеспечивающих высокий энергетический потенциал и защищенность ее главных реакционноспособных связей, и является той основой, которая определяет особое положение сахарозы и её чрезвычайно важную роль для растений.
Помимо сахарозы некоторые исследователи для ряда культур предлагают альтернативные источники углеводного питания [9–16].
Универсальными концентрациями сахарозы являются 10–40 г/л [17]. В условиях длительного депонирования в культуре in vitro сахароза обеспечивает интенсивный рост растений. В связи с этим необходимо выявить концентрации, замедляющие ростовые процессы.
Влияние сахаров апробировано при исследовании многих видов растений в культуре in vitro, ведутся такие исследования и в виноградарстве [18, 19, 20].
С увеличением концентрации сахарозы выше 30 г/л происходит замедление ростовых процессов: уменьшается корнеобразование, длина корней и длина ризогенной зоны, рост и облиственность растений. В процессе культивирования наблюдается вызревание побегов.
Сахароза изучалась на сортах: Фиолетовый ранний, Баклановский, Каберне Совиньон, Белобуланый, Сыпун черный, Виерул-3, Цимлянский Сергиенко, Кумшацкий белый, Цимладар, Рупестрис дю Ло, Красностоп золотовский, Сибирьковый.
Изучение сорбита велось на растениях винограда сортов: Агат донской, Восторг, Каберне Совиньон, Белобуланый.
Изучение источников углеводного питания при культивировании in vitro различных сельскохозяйственных культур, показало неоднозначные результаты, такие как торможение ростовых процессов под действием осмотиков, так и стимулирование их. Результаты исследований противоречивы, и реакция различных растений неодинакова.
Актуальность исследований – совершенствование методов создания и содержания микроклональных коллекций позволит повысить эффективность сохранения биоразнообразия растений рода Vitis.
Новизна исследований заключалась в разработке научных основ сохранения растений винограда в коллекции in vitro, обеспечивающих продолжительное беспересадочное хранение и высокую регенерационную способность растений. Актуальна для этих целей разработка способов применения углеводов (сахароза, сорбит, маннит).
Цель исследования – провести сравнительное изучение особенностей роста и развития растений винограда сортов: Фиолетовый ранний, Каберне Совиньон и Пухляковский на среде с различными углеводами: сахароза, сорбит, манит и без углевода. Выявить оптимальные углеводы и их концентрацию в питательной среде для усовершенствования стратегии и методологии сохранения ценных cортов винограда в коллекции in vitro.
Материалы и методы. Исследования проводили в стационарных условиях лаборатории биотехнологии ВНИИВиВ – филиал ФГБНУ ФРАНЦ по общепринятым в биотехнологии методикам Р.Г. Бутенко (1964, 1999), П.Я. Голодригии др. (1986), Н.П. Дорошенко (2012, 1992) на питательной среде Мурасиге и Скуга.
Питательные среды готовили из минеральных и органических компонентов, которые для удобства группировали в отдельные растворы макроэлементов, микроэлементов, хелатного железа, витаминов, фитогормонов.
Питательная среда (мг/л). Макроэлементы: NH4NO3 212; KNO3 903; MgSO4.7H2O 72; KH2PO4 51; CaCl2. 366. Микроэлементы: H3BO3 1,6; MnSO4.5H2O 6,0; СuSO4.5H2O 0,006; CoCl2 6H2O 0,006; ZnSO4.7 H2O 2,2; Na2MoO4 2H2O 0,6; KJ 0,21; Хелат железа: FeSO4 .7H2O 7,0; Na2 ЭДТА.2H2O 9,3; Витамины: Мезоинозит 50; никотиновая кислота 0,2; ИУК 0,1; сахароза 10 г/л; рН 5,0–5,2.
Сахароза (C12H22O11) относится к группе дисахаридов (входит в класс олигосахаридов), состоит из остатков двух моносахаридов: α-глюкозы и β-фруктозы, является источником углерода, традиционно используемого для размножения in vitro, поскольку он является преобладающим углеводом в соке флоэмы большинства видов растений.
Сорби́т (С6 Н14 О6 – органическое соединение, шестиатомный спирт). Как показал обзор литературы по этому вопросу, ингибирующее действие сорбита в культуре тканей изучалось на многих растениях.
Маннит (маннитол) C6H14O6 – шестиатомный алифатический спирт, бесцветное кристаллическое вещество. Содержится во многих растениях. Обладает холодящим сладким вкусом, хорошо растворим в воде.
Показатели, учитываемые при регенерации и сохранении растений: инфицированность эксплантат, %, размер эксплантат, мм, приживаемость, %, число срезанных микро побегов, шт., гибель от инфекции, %, гибель из-за отсутствия развития, %, число корней, шт., длина корней, см, ризогенная зона, см, высота растения, см, число листьев всего и на 1 см побега, шт., скорость роста, мм/сутки, коэффициент полярности, продолжительность культивирования, дней.
Жизнеспособность растений оценивали с периодичностью один раз в месяц по количеству некрозов тканей листьев и побегов: 0 баллов – визуальная гибель растения, 1 балл – некроз более 50 % тканей растения, 2 балла – некроз менее 50% тканей, 3 балла растения без некроза.
Повторность опытов трехкратная, количество растений 10 шт. в варианте.
Результаты исследований. Рост побегов, листьев, корневой системы, вызревание побегов очень тесно связаны с содержанием и обменом углеводов. Углеводы в питательной среде являются источником энергии для культивируемых растений и основным осмотическим агентом. Замедление роста происходит вследствие изменения характеристик культуральных сред в сторону экзосмоса. Таким образом, происходит имитация для растения недостатка влаги. Действие водного стресса на растение выражается в снижении скорости ростовых процессов, угнетении фотосинтеза и дыхания, снижается ферментная активность, изменяется соотношение минеральных веществ. Дефицит воды уменьшает рост клеток больше, чем их деление и дифференциацию. В результате этого растения, подвергающиеся дефициту воды дифференцируются раньше, листья у них более мелкие, стебли короче.
В исследованиях нашей лаборатории предыдущих лет для каждого сорта закладывали опыт по изучению каждого углевода отдельно в различных концентрациях. В результате исследований была выявлена оптимальная концентрация углевода (сорбита, маннита, сахарозы) из 5–6 изучаемых. Оптимальной концентраций считалась та, которая обеспечивала одновременно максимальную сохранность образцов и продолжительность нахождения в культуре.
В настоящем исследовании проведено сравнения трех углеводов в концентрациях, ранее определенных как оптимальные. Результаты учетов и наблюдений по опытам представлены в таблицах 1–3.
Таблица 1. Рост растений винограда сорта Каберне Совиньон на культуральной среде с различными углеводами (2024–2025 гг.)
| Вариант,
г \л |
Приживаемость,
% |
Корни | Высота, см | Число листьев, шт. | Скорость роста, мм/ сутки | Коэффициент
полярности |
|||
| число, шт | длина, см | ризогенная
зона, см |
всего | на 1 см
побега |
|||||
| 46 суток | |||||||||
| сахароза 10 | 100 | 1,8 | 4,0 | 7,0 | 3,5 | 4,1 | 1,2 | 0,8 | 2,0 |
| маннит 5 | 100 | 1,6 | 2,6 | 4,2 | 3,0 | 3,2 | 1,1 | 0,7 | 1,4 |
| сорбит 5 | 90,0 | 2,0 | 3,4 | 6,8 | 3,1 | 3,8 | 1,2 | 0,7 | 2,2 |
| маннит 10 | 96,7 | 2,1 | 1,5 | 3,2 | 1,3 | 1,6 | 1,4 | 0,3 | 2,6 |
| сорбит 10 | 100 | 2,1 | 2,8 | 5,7 | 3,3 | 3,7 | 1,1 | 0,7 | 1,8 |
| 135 суток | |||||||||
| сахароза 10 | 100 | 2,0 | 5,7 | 11,1 | 14,0 | 12,0 | 0,9 | 1,0 | 0,8 |
| маннит 5 | 100 | 1,8 | 4,6 | 8,1 | 8,3 | 8,9 | 1,1 | 0,6 | 1,0 |
| сорбит 5 | 90,0 | 2,2 | 4,9 | 10,9 | 8,5 | 11,8 | 1,4 | 0,6 | 1,3 |
| маннит 10 | 96,7 | 2,5 | 3,3 | 8,2 | 4,0 | 6,3 | 1,6 | 0,3 | 2,2 |
| сорбит 10 | 100 | 2,4 | 4,5 | 10,6 | 11,1 | 12,5 | 1,1 | 0,8 | 1,0 |
| 257 суток | |||||||||
| сахароза 10 | 73,3 | 2,0 | 5,7 | 11,1 | 16,0 | 18,0 | 1,1 | 0,6 | 0,7 |
| маннит 5 | 100 | 1,8 | 4,6 | 8,1 | 13,7 | 16,3 | 1,2 | 0,5 | 0,6 |
| сорбит 5 | 90,0 | 2,2 | 4,9 | 10,9 | 16,0 | 17,0 | 1,1 | 0,6 | 0,7 |
| маннит 10 | 93,3 | 2,5 | 3,3 | 8,2 | 6,4 | 7,9 | 1,2 | 0,2 | 1,3 |
| сорбит 10 | 96,7 | 2,4 | 4,5 | 10,6 | 16,0 | 17,3 | 1,1 | 0,6 | 0,7 |
Анализируя полученные результаты, отмечаем, что максимальная сохранность растений и снижение темпов роста в опыте на сорте Каберне Совиньон достигнуты на среде с маннитом в концентрации 5 г/л (100 %).
Таблица 2. Рост растений винограда сорта Фиолетовый ранний на культуральной среде с различными углеводами
| Вариант,
г\л |
Приживаемость, % | Корни | Высота, см | Число листьев, шт. | Скорость роста, мм/ сутки | Коэффициент
полярности |
|||
| число, шт | длина, см | ризогенная
зона, см |
всего | на 1 см побега | |||||
| 36 суток | |||||||||
| контроль
сахароза 10 |
100 | 0,7 | 4,8 | 3,4 | 1,1 | 1,4 | 1,2 | 0,3 | 3,1 |
| маннит 10 | 100 | — | — | — | — | — | — | — | — |
| сорбит 10 | 100 | 0,8 | 5,0 | 3,7 | 1,6 | 2,0 | 1,3 | 0,4 | 2,6 |
| без углевода | 100 | 0,4 | 5,2 | 1,8 | 0,5 | 0,5 | 1,1 | 0,1 | 4,1 |
| сорбит 3,5 + сахароза 3,5 | 100 | 0,7 | 7,3 | 5,1 | 1,2 | 1,6 | 1,4 | 0,3 | 4,5 |
| 120 суток | |||||||||
| контроль
сахароза 10 |
85,0 | 1,1 | 7,0 | 7,3 | 6,9 | 9,2 | 1,3 | 0,6 | 1,1 |
| маннит 10 | 25,0 | 1,0 | 3,8 | 3,8 | 2,7 | 7,0 | 2,6 | 0,2 | 1,4 |
| сорбит 10 | 75,0 | 1,0 | 7,6 | 7,6 | 6,9 | 9,7 | 1,4 | 0,6 | 1,1 |
| без углевода | 65,0 | 0,7 | 4,3 | 3,0 | 2,9 | 4,5 | 1,6 | 0,2 | 1,1 |
| сорбит 3,5 + сахароза 3,5 | 85,0 | 1,0 | 9,5 | 9,0 | 5,9 | 10,6 | 1,8 | 0,5 | 1,5 |
| 227 суток | |||||||||
| контроль
сахароза 10 |
55,0 | 0,9 | 6,2 | 5,6 | 11,9 | 16,7 | 1,4 | 0,5 | 0,5 |
| маннит 10 | 25,0 | 1,0 | 6,5 | 6,5 | 4,4 | 13,4 | 3,0 | 0,2 | 1,5 |
| сорбит 10 | 75,0 | 1,1 | 6,9 | 7,6 | 12,9 | 16,1 | 1,2 | 0,6 | 0,6 |
| без углевода | 50,0 | 1,0 | 4,6 | 4,6 | 7,9 | 12,4 | 1,6 | 0,3 | 0,6 |
| сорбит 3,5 + сахароза 3,5 | 80,0 | 1,0 | 9,5 | 9,0 | 11,1 | 15,9 | 1,4 | 0,5 | 0,8 |
Анализируя полученные результаты по сорту Фиолетовый ранний, отмечаем, что максимальная сохранность растений зафиксирована в вариантах с сорбитом в концентрации 10 г/л и в варианте с совместным применением сахарозы и сорбита.
Таблица 3. Рост растений винограда сорта Пухляковский на культуральной среде с различными углеводами
| Вариант, г\л | Приживаемость, % | Корни | Высота, см | Число
листьев, шт. |
Скорость роста,
мм/ сутки |
Коэффициент
полярности |
|||
| число, шт | длина, см | ризогенная
зона, см |
всего | на 1 см побега | |||||
| 36 суток | |||||||||
| контроль сахароза 10 | 100 | 0,6 | 4,9 | 2,9 | 0,8 | 0,9 | 1,2 | 0,2 | 4,0 |
| маннит 10 | 100 | 0,3 | 1,4 | 0,3 | 0,3 | 0,6 | 1,8 | 0,1 | 1,2 |
| сорбит 10 | 100 | 0,3 | 3,3 | 1,0 | 0,3 | 0,5 | 2,0 | 0,1 | 4,0 |
| без углевода | 100 | 0,4 | 4,5 | 1,9 | 0,9 | 1,0 | 1,1 | 0,2 | 2,0 |
| сорбит 3,5 + сахароза 3,5 | 100 | 0,8 | 7,5 | 5,9 | 1,4 | 1,8 | 1,3 | 0,3 | 4,4 |
| 120 суток | |||||||||
| контроль сахароза 10 | 60,0 | 1,2 | 8,9 | 11,2 | 5,6 | 8,3 | 1,5 | 0,5 | 2,1 |
| маннит 10 | 45,0 | 1,4 | 5,6 | 7,3 | 2,7 | 7,5 | 2,8 | 0,2 | 2,7 |
| сорбит 10 | 75,0 | 1,4 | 7,0 | 9,1 | 5,6 | 8,5 | 1,5 | 0,5 | 1,6 |
| без углевода | 70,0 | 1,2 | 7,7 | 8,8 | 5,9 | 8,5 | 1,5 | 0,5 | 1,6 |
| сорбит 3,5 + сахароза 3,5 | 55,0 | 1,4 | 7,3 | 9,8 | 5,4 | 8,9 | 1,7 | 0,4 | 1,8 |
| 227 суток | |||||||||
| контроль сахароза 10 | 55,0 | 1,5 | 10,2 | 14,9 | 10,5 | 16,4 | 1,6 | 0,5 | 1,5 |
| маннит 10 | 35,0 | 1,4 | 9,7 | 12,9 | 5,0 | 13,8 | 2,8 | 0,2 | 2,6 |
| сорбит 10 | 70,0 | 1,7 | 8,7 | 14,3 | 10,7 | 18,7 | 1,8 | 0,5 | 1,3 |
| без углевода | 70,0 | 1,3 | 9,1 | 11,4 | 11,2 | 17,9 | 1,6 | 0,9 | 1,0 |
| сорбит 3,5 + сахароза 3,5 | 50,0 | 1,6 | 8,5 | 13,5 | 11,0 | 18,6 | 1,7 | 0,5 | 1,2 |
Максимальная сохранность растений сорта Пухляковский зафиксирована в вариантах с сорбитом в концентрации 10 г/л и в варианте без углевода. Минимальный рост и сохранность зафиксированы в варианте с маннитом. Максимальный размер ризогенной зоны отмечен в контроле и в варианте сорбит 3,5 г/л + сахароза 3,5 г/л.
Выводы. Проведенные сравнительные исследования выявили оптимальные углеводы и их концентрацию для трех сортов винограда – Каберне Совиньон, Фиолетовый ранний, Пухляковский при депонировании в условиях медленнорастущей коллекции in vitro.
Анализируя полученные результаты, можно сделать вывод, что для сорта Каберне Совиньон оптимальным углеводом является маннит в концентрации 5 г/л. Такая концентрация обеспечивает максимальную сохранность растений (100%) и снижение темпов роста. Для сорта Фиолетовый ранний предпочтительным источником углевода является сорбит в концентрации 10 г/л, а также хорошие результаты дает совместное применение сахарозы и сорбита (по 3,5 г/л). Оба эти варианта обеспечили максимальную в опыте сохранность (70%). Для сорта Пухляковский лучшие показатели сохранности получены при культивировании на среде с сорбитом в концентрации 10 г/л и в варианте без углевода.
Результаты исследований будут использованы для оптимизации протоколов создания и содержания коллекций генофонда этих сортов в культуре in vitro.
Литература
- Дорошенко Н.П., Трошин Л.П., Алзубайди Х.К. Биотехнология ‒ наука и отрасль сельского хозяйства // Научный журнал КубГАУ. №116(02). С. 1700‒1732.
- Looking for old grapevine varieties / C. Jiménez, R. Peiró, A. Yuste, J. García, F. Martínez-Gil, C. Gisbert // Vitis. Vol. 58. № 2. Р. 59–60.
- Горбунов И.В., Лукьянова А.А. Мобилизация и сохранение генресурсов винограда Анапской ампелографической коллекции в 2019 году // Научные труды СКФНЦСВВ. Том 2020. С. 89–93.
- In Vitro Conservation through Slow Growth Storage Technique of Fruit Species: An Overview of the Last 10 Years / C. Benelli, W. Tarraf, T. Izgu, A. De Carlo // Plants (Basel). 2022 № 11(23):3188.
- Оптимизация условий микроклонального размножения и среднесрочного хранения in vitro редкого вида смородины Янчевского для сохранения / А.С. Нұртаза, Д.А. Дюсембекова, С.С. Исламова [и др.] // Вестник Карагандинского университета. Серия: Биология. Медицина. География. 2023. Т. 111. № 3. С. 125–137.
- Маляровская В.И., Шуркина Е.С. Влияние факторов культивирования на длительность депонирования in vitro эндемичного вида Campanul asclerophylla Kolak // Субтропическое и декоративное садоводство. 2022. № 81. С. 98–106.
- Бычкова О.В., Хлебова П., Барышева Н.В. Среднесрочное хранение генофонда картофеля в культуре тканей in vitro // Вестник Алтайского государственного аграрного университета. 2022. № 10(216). С. 12–17. 10.53083/1996-4277-2022-216-10-12-17.
- Гвасалия М.В. Осмотический стресс, вызванный маннитом и его влияние на физиологические и биохимические показатели микропобегов чая (Сamelliasinensis (L.) Kuntze) in vitro // Субтропическое и декоративное садоводство. 2023. № 85. С. 118–131.
- Влияние маннита на рост и физиологические параметры микропобегов чая (Camelliasinensis (L.) О. Kuntze) в культуре in vitro / М.В. Гвасалия, Л.С. Самарина, Л.С. Малюкова [и др.] // Вестник Мичуринского государственного аграрного университета. 2019. № 4(59). С. 49–53.
- Виноградова Е.Г. Использование сахарозы и маннита для дифференциации генотипов льна по устойчивости к осмотическому стрессу // Вестник Казанского государственного аграрного университета. 2020. Т. 15. № 3(59). С. 10–15.
- Виноградова Е.Г. Реакция семян и эксплантов льна на осмотический стресс // Аграрный вестник Урала. 2021. № 2(205). С. 56–64.
- Егорова Н.А., Ставцева И.В. Использование эмбриокультуры для отбора устойчивых к осмотическому стрессу форм шалфея мускатного in vitro // Таврический вестник аграрной науки. 2022. № 1(29). С. 41–56.
- Круглова Н.Н., Сельдимирова О.А. Эмбриогенез in vivo засухоустойчивых регенерантов яровой мягкой пшеницы, полученных в эмбриокультуре in vitro // Таврический вестник аграрной науки. 2022. № 1(29). С. 65–78.
- Черкасова Н.Н., Жужжалова Т.П. Создание растений регенерантов сахарной свеклы, толерантных к ионному и осмотическому стрессу // Сахарная свекла. 2020. № 8. С. 7–10.
- Бъядовский И.А. Влияние различных сахаров и пониженной температуры на способность к хранению клоновых подвоев яблони в культуре in vitro // Селекция и сорторазведение садовых культур: Материалы Международной научно-практической конференции, посвященной 170-летию ВНИИСПК. 2015. С. 27–29.
- Черкасова Н.Н. Получение растений-регенерантов сахарной свёклы с устойчивостью к засухе и кислотности среды // Аллея науки. Т. 2. № 7 (23). 2018. С. 456−459.
- Cassels A.S., Debergh P.C., Zimmerman R. Problems in Tissue Culture: Culture Contamination. (eds.) // Micropropagation Technology and Application. Kluwer Academic Publishers. Dordrecht. Netherlands. 1991. P. 31−44.
- Reed B.M., Buckley P.M. Bacteriology Handbook // NCGR. Corvallis, Or. USA. 1999. P. 39.
- Пузырнова В.Г., Дорошенко Н.П. Углеводы в составе культуральной среды для создания коллекции винограда in vitro // Русский виноград. 2023. Т. 25. С. 62–76.
- Влияние концентрации сахарозы в питательной среде и слабых стрессовых воздействий на фотосинтетические показатели винограда при переводе из культуры in vitro в условия ex vitro / М. А. Сундырева, А. Н. Ребров, А. Е. Мишко [и др.] // Плодоводство и виноградарство Юга России. 2023. № 79(1). С. 108–127.
Загрузка...
Перезагрузить документ 
Открыть в новой вкладке